شناسایی و تشخیص ویروس موزاییک معمولی لوبیا و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا با استفاده از روش immunocapture rt-pcr

نویسندگان

نگیسا سالاری

nagisa salari plant protection group, varamin agricultural collegeگروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی ورامین مریم سید موسوی

maryam seyed musavi microbiology department, college of biological sciences, alzara universityگروه میکروبیولوژی ، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه الزهرا نوح شهر آئین

noooh shahraeen plant virus research department, iranian research institute for plant protection-tehranبخش تحقیقات ویروس شناسی گیاهی- مؤسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور شیرین قربانی

shirin ghobani plant protection group, varamin agricultural collegeگروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی ورامین مژده ملکی

چکیده

سابقه و هدف: در بین عوامل ویروسی متعددی که باعث بروز علایم موزاییک و ایجاد خسارت در گیاه لوبیا چیتی (phaseolus vulgaris l. ) میشوند، دو ویروس موزاییک معمولی لوبیا bcmv و ویروس موزاییک نکروتیک لوبیا bcmnv اهمیت ویژه ای دارند . به منظور ردیابی این دو ویروس و تعیین برخی خصوصیات سرولوژیک و مولکولی آنها، در یک فصل زراعی نمونه هایی با علایم موزاییک ، رگبرگ روشنی ، برگشتگی ، نکروتیک برگ و ساقه لوبیا جمع آوری گردید. مواد و روش ها: به منظور ردیابی این دو ویروسدر ابتدا نمونه ها با روشهای سرولوژیکdas-elisa و لکه گذاری بافتی (tissue-blot) با آنتی سرم های چند همسانه ای اختصاصی مورد سنجش و ردیابی قرار گرفتند. سپس جهت تأیید و بررسی دقیق تر ، نمونه های انتخابی آلوده در الایزا با آزمون ic-rt-pcr مورد ارزیابی قرار گرفتند یافته ها: cdna بدست آمده در دستگاه ترموسایکلر تکثیر گردید. محصول حاصل در ژل آگاروز الکتروفورز شد..باند حاصل به اندازه تقریبی 373 باز و 683 باز از سکانس منطقه ای از ژن پروتئین پوششی ویروس مورد نظر به ترتیب برای ویروس موزاییک معمولی و ویروس موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا مشاهده گردید.. با بکارگیری تکنیک ic-rt-pcr وبر اساس مقایسه سایز باند های ایجاد شده در این روش ،دو ویروس مذکور ازگیاهان لوبیای آلوده مناطق اراک ، نیشابور ، زنجان وکرج شناسایی و تفکیک گردید. نتیجه گیری:ویروس موزاییک معمولی و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا بطور گسترده ای در اغلب مناطق کشت و کار لوبیا در ایران پراکنده هستند. و در بعضی اوقات نیز به طور مشترک و تواما گیاه لوبیا را آلوده میسازند. نشان داده شده که تکنیک ic-rt-pcr برای شناسایی و تشخیص این دو ویروس از حساسیت بالایی نسبت به روش الایزا بر خوردار است. در این تکنیک بکارگیری همزمان و مخلوطی از آنتی سرم اختصاصی ویروس و پرایمر های مربوطه با عث شناسایی و تفکیک همزمان دو ویروس در صورت آلودگی توام خواهد شد .

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

شناسایی و تشخیص ویروس موزاییک معمولی لوبیا و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا با استفاده از روش Immunocapture RT-PCR

سابقه و هدف: در بین عوامل ویروسی متعددی که باعث بروز علایم موزاییک و ایجاد خسارت در گیاه لوبیا چیتی (Phaseolus vulgaris L. ) میشوند، دو ویروس موزاییک معمولی لوبیا BCMV و ویروس موزاییک نکروتیک لوبیا BCMNV اهمیت ویژه ای دارند . به منظور ردیابی این دو ویروس و تعیین برخی خصوصیات سرولوژیک و مولکولی آنها، در یک فصل زراعی نمونه هایی با علایم موزاییک ، رگبرگ روشنی ، برگشتگی ، نکروتیک برگ و ساقه لوبیا ج...

متن کامل

ردیابی همزمان سه ویروس موزائیک معمولی، موزائیک معمولی بافت مرده‌ی لوبیا و موزائیک خیار با استفاده از Multiplex-RT-PCR

ویروس‌ موزائیک معمولی لوبیا (Bean common mosaic virus, BCMV)، ویروس موزائیک معمولی بافت مرده‌ی لوبیا (Bean common mosaic necrosis virus, BCMNV) و ویروس موزائیک خیار (Cucumber mosaic virus, CMV) از ویروس‌های بذربرد لوبیا می‌باشند که به طور جدی باعث افت کمی و کیفی این محصول می‌شوند. بدلیل وجود گزارش‌های متعدد از آلودگی مخلوط لوبیا با این سه ویروس، معرفی روشی دقیق، سریع ...

متن کامل

واکنش ژنوتیپ های مختلف لوبیا چشم بلبلی (vigna sinensis) به ویروس موزاییک معمولی لوبیا (bcmv) در شرایط گلخانه

ویروس موزاییک معمولی لوبیا (bean common mosaic virus) دارای گسترش جهانی وسیعی بوده، باعث کاهش عملکرد و همچنین نقصان در کیفیت محصول می­گردد. بکارگیری ژنوتیپ های متحمل و مقاوم از راهکارهای اصلی مدیریت این بیماری می باشد. بیست ژنوتیپ لوبیا چشم بلبلی در دو آزمایش مجزا با اعمال متغیرهای آلودگی و عدم آلودگی در قالب طرح بلوک های کامل تصادفی با سه تکرار در شرایط گلخانه مورد بررسی قرار گرفتند. آلودگی در...

متن کامل

بررسی اثر تابش دزهای پایین پرتوی گاما به‌ تنهایی و یا همراه با اسید سالیسیلیک و حرارت غیرمستقیم بر آلودگی بذرزاد ویروس موزاییک معمولی لوبیا در گیاه لوبیا

در این پژوهش تأثیر دزهای پایین پرتوی گاما (10، 20 و 30 گری) به‌تنهایی و همچنین همراه با اسید سالیسیلیک و حرارت غیرمستقیم بر ویروس بذرزاد موزاییک معمولی لوبیا (BCMV)، بررسی شد. بذور لوبیای رقم تجاری "صدری" دارای آلودگی بذرزاد به ویروس BCMV کشت شدند. گیاهچه­های آلوده و عاری از ویروس بر اساس آزمون الایزای غیرمستقیم (PTA-ELISA) تفکیک و از آن­ها بذرگیری شد. نتایج نشان داد که شاخص­های رشدی در گیاهچه­...

متن کامل

مقایسه ویژگی های بیولوژیکی و مولکولی ویروس موزاییک معمولی لوبیا (bcmv) جدا شده از مزارع لوبیا در استان زنجان

لوبیا (phaseolus vulgaris l.) یکی از حبوبات مهم در ایران و بسیاری از کشورها می-باشد. ویروس¬های زیادی موجب خسارت کمی و کیفی در مزارع لوبیا می¬شوند که از جمله¬ی آن¬ها می¬توان به ویروس موزاییک معمولی لوبیا و ویروس موزاییک معمولی بافت مرده¬ی لوبیا اشاره کرد. این ویروس¬ها از خانواده¬ی پوتی¬ویریده و جنس پوتی¬ویروس می¬باشند. در این پژوهش تعداد 215 نمونه¬ی مشکوک به بیماری ویروسی از چهار منطقه¬ی استان ز...

15 صفحه اول

بررسی ویروس موزاییک معمولی لوبیا (bcmv) و تعیین پراکنش آن در منطقه مشهد و چناران

از مزارع لوبیا در مناطق مشهد و چناران در سال زراعی 1375، بر اساس علائم مشکوک به آلودگی ویروس موزاییک معمولی لوبیا (bcmv)، نمونه برداری صورت گرفت . از مجموع 185 نمونه جمع آوری شده، تعداد 39 نمونه به ویروس موزائیک معمولی لوبیا آلوده بودند. نمونه های جمع آوری شده از لحاظ احتمال آلودگی به این ویروس موزائیک خیار (cmv) نیز مورد بررسی قرار گرفتند و هیچگونه آلودگی به این ویروس مشاهده نگردید، جهت بررسی ...

15 صفحه اول

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی - مولکولی

جلد ۳، شماره ۱۱، صفحات ۲۱-۲۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023